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(知识点)化学实验基本知识:LB,培养基

2024-03-01 21:03:16疾病常识
其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。LB固体培养基1L和液体一样,加10g~1.配制:培养基加入1~LB培养基与琼脂培养基之间的两大区别:液体的用于单克隆菌种扩大培养,提取目的基因或者蛋白之用。LB培养基的配方如下:

LB培养基配置:

元素:

胰蛋白胨()10克;

酵母抽提物(酵母)5g;

氯化钠(NaCl)10g;

制备方法:

(1) 分别称取所需量的胰蛋白胨、酵母抽提物和氯化钠,置于烧杯中;

(2)将所需量的2/3蒸馏水溶解加入烧杯中,用玻璃棒搅拌,使药物完全溶解;

(3)调节pH 用1mol/L NaOH溶液调节pH至7.2;

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(4)将溶液定容倒入量筒中,加水至所需体积;

(5)加入琼脂酵母粉是什么酵母粉是什么,加入所需量的琼脂,加热融化,补充水分损失;

(六)包装、填塞、包扎;

(7)100Pa高压蒸汽灭菌20分钟;

固体培养基中加入15-20g琼脂粉;

LB固体培养基1L与液体相同。 添加10g~15g琼脂粉。 一定要在气温下降之前补充抗生素。

维生素,倒好盘。

LB固体培养基倾注板:

1、准备:培养基中加入1~1.5g琼脂粉

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2、添加抗生素:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置于55℃水浴中。 当培养基温度降至55℃(手可触及)时添加抗生素,避免因温度过高而导致抗生素失效。 ,并摇匀。

3、倒入盘中:一般一盘倒入15ml-20ml。 将培养基倒入培养皿后,打开盖子,将其暴露在紫外线下10-15分钟。

4、储存:用封口胶带密封边缘,4℃下倒置储存,并在1个月内使用。

LB培养基的优点:

LB 培养基由蛋白胨、酵母提取物和氯化钠组成。 首先,蛋白胨是一种经过胰蛋白酶处理的蛋白质。 经过处理后,大蛋白质分子的分子量变小,更容易被细菌利用。 此外,它还含有嘌呤,可提供生长因子。 如果你想培养大肠杆菌,用普通蛋白胨代替胰蛋白胨其实是没有问题的。 蛋白胨为细菌生长提供氮源。 其次,培养基中酵母抽提物的主要成分是氨基酸、小肽、核苷酸、B族维生素。 它们主要为细菌提供维生素和微量元素,是细菌生长所必需的。 氯化钠在培养基中的作用是维持渗透压并提供无机盐。

LB培养基和琼脂培养基的两大区别:

区别一:琼脂培养基是LB培养基,加入琼脂粉浓缩成固体状。 固体LB培养基用于细菌涂片和抗性筛选,以选择单克隆。 该液体用于单克隆菌株的扩增和提取目的。 对于基因或蛋白质。

区别之二:LB培养基是液体,而营养琼脂培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)是固体。 具体公式问题——LB培养基的公式如下:

胰蛋白胨()10g/L 酵母提取物(Yeast)5g/L 氯化钠(NaCl)5g/L。 另外,根据经验值用NaOH调节培养基pH至7.4,然后培养大肠杆菌。 营养琼脂培养基配方:牛肉浸膏0.3g

1g蛋白胨,0.5g氯化钠,2g琼脂,100mL自来水,pH 7.0~7.2。