免疫荧光法免疫化学发光法的检测方法有哪些？

降钙素原（PCT）的测试方式

免疫萤光法

免疫萤光法是一种定量的免疫学检查方式。按照高特异性抗体和抗原的反应，预先在聚酰亚胺膜上包被的有金标记降钙素原（PCT）的单克隆抗原和样本中的降钙素原结合，在毛细的效应下，结合物向下层析，用免疫定量的剖析仪对检查区进行扫描儿童降钙素原偏高说明什么，取得相应发光讯号。萤光讯号的硬度与标本PCT含量成反比，同时测量已知PCT含量的标准品，纯化标准曲线，因而定量得到标本的PCT含量。那种方式操作便捷、线性范围宽、精密度高、重复性较差，被广泛应适于试验室。但还有一定的局限性，有时会出现假阳性和假阴性的结果。

免疫物理发光法

免疫物理发光法是利用双单克隆抗原，其中一个抗原为降钙素抗原儿童降钙素原偏高说明什么，另一个为抗钙素抗原，分别结合到PCT分子的降钙素和抗钙素部位，可排除交叉反应。其中一个抗原是光标记的，另一个未标记的抗原固定在试管的内壁，反应过程中两个抗原与PCT分子结合而产生面包复合体，发光部坐落反应管的表面。该法操作简便，特异性强，敏感性高，测量的低限值为0.1ng/mL，2h可以出结果。

胶体金免疫层析法

胶体金免疫层析法是一种半定量的测试方式，包括胶体金标记的抗降钙素的单克隆抗原和用作包被的抗降钙素多克隆抗原，当标本(血浆或血清)加人标本孔，金标单克隆抗原与标本中的PCT结合，产生金标记的抗体抗原复合物。该复合物在反应膜上联通，与固定在膜上的抗降钙素抗原结合产生更大的复合物。当PCT多于测试下限时，夹心复合物呈白色带，色调厚薄与样品中的PCT含量成反比。未结合的示踪物扩增到对照区，结合并形成白色的对照色带。

半定量PCT测试有办法简略、报告结果快、不受标本数目和特殊设备限制等特点，因此因为半定量测量还要肉眼观察色带，不同操作者的判定或许迥然不同，尤其是接近阴性下限时比较难分辨，有时或许欺骗临床大夫的诊治。比较适宜门诊科、ICU等危重监护病人的定性判别。

乳胶提升免疫比浊法

乳胶提升免疫比浊法中，酚醛烯烃颗粒表面修饰有抗原，当测量样品中有降钙素原（PCT）存在时，基于免疫沉淀反应原理产生不可溶免疫复合物。异戊二烯提升免疫比浊费用低，功耗良好，灵敏度高，操作简便，更适宜临床推广应用。

放射免疫学剖析法

利用人工合成降钙素原（PCT）多抗特异性地辨识并连结合成多肽PCT。此步骤测试的血浆PCT含量可准确到4pg/ml，既能测量游离PCT，又能测量结合性的PCT。该办法与酶免法、免疫物理发光法相比，虽增加了测量的灵敏度，但测试过程历时长，需9-12h，并带有放射性元素的污染，故临床应用遭到限制。

酶联免疫及其他测量方式

酶联免疫法应用双抗原夹武学测量人降钙素原(PCT)水平。用提纯的人降钙素(PCT)抗原包被多孔板，制成液相抗原，往包被子抗的多孔中依次加入降钙素(PCT)，再与HRP标记的降钙素(PCT)抗原结合，产生抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底漂洗后加配体TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转换成红色，并在酸的作用下转换成最终的蓝色。色调的厚薄和样品中的降钙素(PCT)呈正相关。用酶标仪在450nm波速下测量吸色度（OD值），通过标准曲线估算人降钙素(PCT)含量。

其它测量方式

另外也有乳膏层析法以及高效气相色谱剖析法，这两种方式测量结果准确，但比较历时，成本高昂，所以限制了他们在临床的试用。

参考文献

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