各种生物的胚胎毒素被证明对多种生物具有致命毒性
整个河豚毒素浓度在粗糙的皮肤蛙类的卵胚胎发育过程中的集聚摘要:河豚毒素是一种在多种生物体的发觉一个神秘的神经毒素。不幸的是,河豚毒素(TTX)在生物体整个生活史阶段的毒性了解得并不多。粗糙皮肤鬣蜥在各类生物中拥有最大量的河豚毒素,大量的研究这些物种中的机制。我们进行了一系列的研究,针对下述问题:(1)不同来源的幼卵的毒性?(2)幼卵变化期间胚胎期间中TTX含量的变化发展?(3)是否是鬣蜥卵衣合成的TTX?我们发觉,幼卵的毒性大小取决于幼卵在雀鳝卵簇中的相对位置。最先形成的卵簇中间的卵拥有更多的毒素。在幼卵到孵化的过程中,毒素仍然都在形成。卵衣富含少量的河豚毒素,并且并不和胚胎所含毒素有关,这种结果澄清一些有关胚胎毒性和常年持有的解释。继续探讨河豚毒素在这些两栖植物中的发展模式。引言:河豚毒素是自然界发觉的一种毒性很强,研究好多的神秘的物质。此神经毒素非蛋白质,鈲离子--结合于电流门控钠通道在神经和骨骼肌。此操作可避免动作电位的传播这促使它成为被研究的天然毒素神经。并且,不幸的是,这个机制也会造成死亡。河豚毒素被证明对多种生物具有致命毒性,包括人在内。虽然多种生物中都发觉富含河豚毒素,包括微生物之类的。
例如,互生单包菌,杆菌都可形成少量的河豚毒素。在真核生物中,河豚毒素已确定来自于海洋生物,包括甲藻组织中,扁虫,海蛞蝓,龙虾,海星,和章鱼。在腰部植物中,河豚毒素是系统发育,受限于两期植物和鸟类。这些毒素以物种鲀(包括河豚)命名。这类物种在其皮肤、肝脏和脾脏中富含大量的河豚毒素。英国传统的河豚鱼消费曾引起大量的人类中毒风波。在两栖植物中,河豚毒素是一种保护机制。虽然我们早已晓得了河豚毒素存在的这么多物种,并且我们并不晓得河豚毒素的来源和合成机制。在海洋生物,河豚毒素生产菌的存在引起一些作者推断这些毒素的形成由共生真菌和被觉得具有其他功能。TX的变化史模式在陆地鬣蜥中得到了充分证明,这个系统的细节证明有真菌形成的假定缺乏证据。例如,一个成年鬣蜥最多在肾脏和皮肤形成,一只角蛙课富含29微克的河豚毒素,足够杀害58个人。这样的量比真菌形成的要多600到5500倍。而且在雀鳝形成毒素的最多的皮肤、肝脏、和子宫并没有存在病菌的DNA。而且随着雄性鬣蜥的饲养,毒素降低,卵中也富含毒素。虽然对于我们的理解了角蛙个体发育过程中的毒性变化,仍然存在几个关于鬣蜥的毒性的问题。成年雄性鬣蜥在其卵中储备了大量的河豚毒素。
不确定的是同一簇卵中是否富含相同数目的毒素。许多物种能否调节幼卵中所富含的毒素的量。这个机制有力地说明了雄性鬣蜥的适应性,另外毒素在幼卵孵化过程中的变化不确定,但是,一些文献报导,毒素会轻微地减小。回答那些问题可以说明鬣蜥生命周期中毒素的变化。我们企图来回答那些问题。尤其我们用同一簇卵做了3个实验,关于胚胎发育周期中毒素的变化,以及卵中和卵包被中毒素的比较。2,材料和技巧2,1植物的搜集和繁殖2012年和2013年的3月从固定的地点搜集的雄性鬣蜥,并迅速被送往实验室中,并被圈养在装有2升水的5.7升的容器中。每只都被圈养在21度的环境条件下,注射15下挫的LHRH来剌激孵卵。每位雄性都提供一簇聚脂纤维作为精子集聚地。孵卵前不供给鬣蜥任何食物。2,2实验1同一簇卵中的的毒素浓度是否有差别?为了证明同一簇卵中的毒素浓度是否有差别,每四个雄性产一簇卵,之后被移走,标记每位卵的位子。前十个被移走的精子重0.001g,并在零下80度结冰。最初的精子被搜集后,雌性则被准许形成更大的卵簇(50-100个)。之后将它们移走,用于实验2。以后再形成10个卵,再被移走,称重,并在零下80度冻结。
重复此操作,直至雄性产完卵。对于河豚毒素的剖析,三组精子随机检查其毒素浓度,含量。又由于,每位雄性形成的卵的个数不一样,每一簇的剖析周期便不同。河豚毒素和孵卵先后次序之间的关系随机测定。2,3实验2随着胚胎的发育,毒素浓度是否放生变化。为了评估毒素浓度在胚胎发展过程中的变化,我们搜集了每一个雄性最先形成的100个卵,而且把它们分别置于5毫升的容器中,装4毫升的水,保持环境气温21度。这一百个卵须要再24h内产出,虽然一个雄性要形成出足够数目的精子须要48h。将精子迅速转移至容器中河豚毒素在哪,随机是个一组。用显微镜观测记录不同的生长发育阶段。每一个精子的重量大概0.001g,并在零下80度的条件下冷藏。重复此操作。剖析第6天,第10天和第18天的样品进行剖析。每一个精子被标记4个阶段。每位精子须要18天孵化。因而河豚毒素在第18天的剖析不包括卵包被中的浓度。对于河豚毒素剖析,来自于不同雄性的3个精子随机检查。为了测定不同阶段的毒素浓度。我们将总毒素浓度和阶段性浓度进行比较,并进行数据剖析处理。2,4实验3,卵包衣中富含多少毒素呢?为了剖析卵包衣中是否富含毒素,我们搜集了从不同的雄性搜集了近来产的卵,并将胚胎移除。
胚胎称重约0.001g,并转移至显微管中。并将所有样品迅速在零下80度冷藏。并将毒素浓度进行比较画图。2,5毒素浓度用新描述的方式对精子样品进行剖析。在没有河豚毒素或在低含量的河豚毒素的,该抗原结合到缀合物在板使二次抗原与还结合到所述板河豚毒素在哪,因而造成高吸收。也因而可用线性曲线来估测河豚毒素的含量。所有的样品根据1:2,1:4,1:8,1:16,1:32.所有的样品均在405nm的条件下检测。3,结果:3,1同一簇精子所富含的毒素是否不同?精子中的毒素浓度从开始到最后逐步降低,也就是说,精子中的毒素含量和其形成的先后次序有关,对每一个雄性来说,平均的毒素浓度依次为最开始形成的精子毒素浓度的88%,84%,64%,45%。3,2河豚毒素是否随着卵泡的孵化而发生改变呢?精子中的毒素总浓度基本上没有随着卵泡的孵化而发生改变。并且在孵化的不同阶段却有差异。此类情况,在精子孵化时,河豚毒素的含量孵化后增高。并且和最初的毒素含量相差却不大。3,3卵包衣中富含多少毒素?有九分之四的精子包衣中的毒素浓度。这种浓度在11.8ng和28ng之间变化。大量的毒素在每位精子的胚胎中,变化范围在和之间。
精子毒素含量和包衣毒素含量之间没有关系。讨论:两个历史性推论早已在原先得出。本实现所得到的数据显示,鬣蜥胚胎体内的毒素浓度并没有随着胚胎的发育而减轻。虽然随着胚胎的发育毒素的含量会有变化,并且总数还是相对稳定的,并没有遗失。孵化以后,毒素的含量出现快速下降,而且不是由于包衣中毒素的流失。第二个解释是雄性所形成精子所富含的所有毒素基本一致。结果显示,在卵簇中不同位置的精子富含的毒素浓度多少会有差别。最早被产下的精子富含的毒素量最大,最后形成的精子只富含最足月的精子毒素量的12%到55%。不幸的是,卵簇中的精子毒素浓度的差别的机制比较困难,由于毒素那里形成的不确定。但是,一个可能的解释就是雄性体内的毒素浓度有限从而引起了精子毒素浓度的不同。综上所述,实验中数据显示在初期的蛙类发展时期毒素浓度会发生变化,一个雄性鬣蜥,会随着不同生产的顺序,其精子中毒素的浓度会发生变化。最毒的精子可以长时间地生存,并能孵化。而且孵化后的毒素浓度和一开始的毒素浓度基本一致。大概浓度为400ng,足够保护精子孵化。精子孵化后的28周内,毒素浓度依然足够保护精子抵抗外来侵犯。这个研究表明两个重要的成份。当合初期的研究结合在一起,这种数据则表明了毒素变化情况。伦理申明:……附注:……我们非常谢谢……利益争辩:作者申明没有任何利益争辩,所有经济支撑都已申明。参考文献:……
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