(知识点)化学实验基本知识:LB,培养基
LB培养基配置:
元素:
胰蛋白胨()10克;
酵母抽提物(酵母)5g;
氯化钠(NaCl)10g;
制备方法:
(1) 分别称取所需量的胰蛋白胨、酵母抽提物和氯化钠,置于烧杯中;
(2)将所需量的2/3蒸馏水溶解加入烧杯中,用玻璃棒搅拌,使药物完全溶解;
(3)调节pH 用1mol/L NaOH溶液调节pH至7.2;
(4)将溶液定容倒入量筒中,加水至所需体积;
(5)加入琼脂酵母粉是什么酵母粉是什么,加入所需量的琼脂,加热融化,补充水分损失;
(六)包装、填塞、包扎;
(7)100Pa高压蒸汽灭菌20分钟;
固体培养基中加入15-20g琼脂粉;
LB固体培养基1L与液体相同。 添加10g~15g琼脂粉。 一定要在气温下降之前补充抗生素。
维生素,倒好盘。
LB固体培养基倾注板:
1、准备:培养基中加入1~1.5g琼脂粉
2、添加抗生素:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置于55℃水浴中。 当培养基温度降至55℃(手可触及)时添加抗生素,避免因温度过高而导致抗生素失效。 ,并摇匀。
3、倒入盘中:一般一盘倒入15ml-20ml。 将培养基倒入培养皿后,打开盖子,将其暴露在紫外线下10-15分钟。
4、储存:用封口胶带密封边缘,4℃下倒置储存,并在1个月内使用。
LB培养基的优点:
LB 培养基由蛋白胨、酵母提取物和氯化钠组成。 首先,蛋白胨是一种经过胰蛋白酶处理的蛋白质。 经过处理后,大蛋白质分子的分子量变小,更容易被细菌利用。 此外,它还含有嘌呤,可提供生长因子。 如果你想培养大肠杆菌,用普通蛋白胨代替胰蛋白胨其实是没有问题的。 蛋白胨为细菌生长提供氮源。 其次,培养基中酵母抽提物的主要成分是氨基酸、小肽、核苷酸、B族维生素。 它们主要为细菌提供维生素和微量元素,是细菌生长所必需的。 氯化钠在培养基中的作用是维持渗透压并提供无机盐。
LB培养基和琼脂培养基的两大区别:
区别一:琼脂培养基是LB培养基,加入琼脂粉浓缩成固体状。 固体LB培养基用于细菌涂片和抗性筛选,以选择单克隆。 该液体用于单克隆菌株的扩增和提取目的。 对于基因或蛋白质。
区别之二:LB培养基是液体,而营养琼脂培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)是固体。 具体公式问题——LB培养基的公式如下:
胰蛋白胨()10g/L 酵母提取物(Yeast)5g/L 氯化钠(NaCl)5g/L。 另外,根据经验值用NaOH调节培养基pH至7.4,然后培养大肠杆菌。 营养琼脂培养基配方:牛肉浸膏0.3g
1g蛋白胨,0.5g氯化钠,2g琼脂,100mL自来水,pH 7.0~7.2。