河豚鱼检测毒素的常用方法有哪些？NO.1

我国河豚鱼饲养业发展迅猛，在国外产生一定的种植规模。随着河豚鱼人工控毒种植技术和TTX测量技术的不断成熟，对河豚鱼施行科学有效管理，代替国外现行的“一刀切”式的禁食式管理的呼声越来越大。目前我国确已产生一定规模的河豚鱼消费市场，为此，十分有必要进一步强化河豚鱼饲养生产过程中TTX的监控，研究拟定河豚鱼的卫生管理办法从而逐渐解禁河豚鱼消费市场，以满足市场经济发展的需求。要想强化河豚鱼饲养生产过程中TTX的监控，TTX的测量方式必不可少。这么，测量河豚毒素的常用技巧有什么呢？小编在此做了一下整理，供诸位参考。

❖NO.1❖

大鼠生物法

是最原始、最直观的测量方式，通过家兔死亡前所呈现出的典型的河豚毒素中毒病症，可迅速地将河豚毒素与其它致死性物质区分开。其原理是，按照大鼠注射试样提取液后的死亡时间，查出鼠单位，并根据大鼠体重校准单位，估算确定河豚毒素浓度。此方式测得的毒力用大鼠单位来表示。

优点：大鼠法不须要特殊装置，操作简便，适用于基层检验。

缺点：估算方法复杂，重复性差、费时吃力，个体差别大、重现性不好，并且需有一定规模能够客观反映实验结果。

❖NO.2❖

气相色谱-串联质谱法

试样经提取后借助免疫亲和柱净化，借助气相色谱将混和物进行分离，对分离的组分进行质谱测量，能同时进行定性定量剖析。外标法定量，本方式的测量限为1μg/kg，定量限为３μg/kg。

优点：灵敏性高，对样品的适用性广，不须要衍生化，大大简化了剖析工作量。能确切的定量剖析河豚毒素，剖析结果具权威性。

缺点：剖析时间长、分析过程复杂、检测费用高、专用仪器高昂、对样品的含量要求较高

❖NO.3❖

气相色谱-萤光测量法

试样经提取后借助免疫亲和柱净化河豚鱼中含的河豚毒素是，气相色谱——柱后衍生萤光法测定，以保留时间定性，外标法定量。本方式的测量限为50μg/kg，定量限为150μg/kg。

优点：较其他方式灵敏度高，较气相色谱-串联质谱法灵敏度低，对样品的适用性广。

缺点：ＴTX没有萤光吸收，必须先要衍生化成具有萤光吸收的物质，需衍生装置，操作比较冗长。

❖NO.4❖

酶联免疫吸附法(ELISA)

试样中的河豚毒素经提取、脱脂后与一定量的液相抗体竞争结合一定量的抗原，加入酶标二抗反应，最后加入显色液，显色深浅与试样中待测河豚毒素浓度呈负相关，试样中河豚毒素浓度越高，显色越浅。

优点：酶联免疫吸附法快速、灵敏，不须要复杂和高昂的仪器，可以实现大量样本的初筛工作，满足现场工作的须要。

缺点：严格来讲，此方式为半定量测量。

❖NO.5❖

胶体金法

试样经提取液提取，离心后取上清待测。其原理为待测液中的抗体与ＮＣ膜上的预划的抗体竞争结合一定量的抗原，致使ＣＴ线呈现出不同的显色水平。将待测液滴加至检查卡的加样孔中，一定时间后按照ＣＴ线的显色情况进行检查结果的判读。

优点：检查便捷，历时短，效率高，单个样本检查仅需１０－１５ｍｉｎ，可以满足大量样本的初筛工作。

缺点：检查结果为定性判读，未能得到具体浓度数值。

除前面常规的测量方式外，国外报导的还有分光光度计法、薄层层析法、高效毛细管区带电泳法等方式。这种方式确切度不高，操作相对复杂。国内也有柱转换气相色谱/质谱/电喷雾法、薄层层析/快原子轰击质谱法、亲水作用色谱-电喷雾质谱法、电喷雾离子化质谱法等方式的报导，这种方式所需仪器设备都高昂，也不易于普遍推广。

目前河豚毒素的测量方式多种多样，各有优劣点河豚鱼中含的河豚毒素是，应按照须要选择合适的测量方式。

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